高效液相色谱仪的组成及分类

一. 高压输液系统

　　贮液装置、高压输液泵、过滤器、脱气装置等

　　1. 贮液器：贮液器用于存放溶剂。溶剂必须很纯，贮液器材料要耐腐蚀，对溶剂呈惰性。贮液器应配有溶剂过滤器，以防止活动相中的颗粒进进泵内。溶剂过滤器一般用耐腐蚀的镍合金制成，空隙大小一般为2mm。

　　2. 脱气装置：脱气的目的是为了防止活动相从高压柱内流出时，开释出气泡进进检测器而使噪声剧增，甚至不能正常检测。

　　3. 高压输液泵 高压输液泵是高效液相色谱仪的重要部件，是驱动溶剂和样品通过色谱柱和检测系统的高压源，其性能好坏直接影响分析结果的可靠性。

　　对高压泵的基本要求是：

　　①流量稳定；②输出压力高，输出压力为50Mpa；③流量范围宽，可在0.01～10ml／min范围任选。④耐酸、碱、缓冲液腐蚀。⑤压力波动小。

　　2. 梯度洗脱装置 梯度洗脱是利用两种或两种以上的溶剂，按照一定时间程序连续或阶段地改变配比浓度，以达到改变活动相极性、离子强度或pH值，从而进步洗脱能力，改善分离的一种有效方法。当一个样品混合物的容量因子是范围很宽，用等度洗脱时间太长，且后出的峰形扁平不便检测时，用梯度洗脱可以改善峰形、并缩短分离时间。HPLC的梯度洗脱与GC的程序升温相似，可以缩短分析时间，进步分离效果。使所有的峰都处于分离状态，而且峰形尖而窄。

　二. 进样器

　　进样器一般要求密封性好，死体积小，重复性好，保证中心进样，进样时对色谱系统的压力和流量波动小，并便于实现自动化。

　　高压进样阀是目前广泛采用的一种方式。阀的种类很多，有六通阀、四通阀，双路阀等。以六通进样阀为常用。

　三.分离系统

　　色谱分离系统包括色谱柱、固定相和活动相。色谱柱是其核心部分，柱应具备耐高压、耐腐蚀、抗氧化、密封不漏液和柱内死体积小、柱效高、柱容量大、分析速度快、柱寿命长的要求。通常采用优质不锈钢管制成。

　　色谱柱按内径不同可分为常规柱、快速柱和微量柱三类。

　　常规分析柱柱长一般为10~25cm，内径4 ~ 5mm，固定相颗粒直径为 5 ~ 10 mm。为了保护分析柱不受污染，一般在分析柱前加一短柱，约数厘米长，称为保护柱。

　　（微量分析柱内径小于l mm，凝胶色谱往内径3～12 mm，制备往内径较大，可达25 mm以上。）

四. 检测系统

　　检测器的作用是将柱流出物中样品组成和含量的变化转化为可供检测的信号，常用检测器有紫外吸收、荧光、示差折光、化学发光等。