荧光分光光度计的操作方法

　　荧光分光光度计是一种定性、定量分析的仪器。以下是荧光分光光度计的操作方法：

1.开机

　　插入电源线，按下电源开关，荧光分光光度计即可启动。

2.预热

　　在荧光分光光度计启动后，建议预热10~30分钟，以确保仪器稳定工作。预热时可选择标准光源，调出UV灯，使得仪器的紫外光源能够正常工作。

3.设置波长

　　选择需要测量的荧光波长，并将荧光分光光度计的光路设置为荧光模式。荧光波长通常在激发波长的附近，可以参考相关文献或自行实验确定。

4.调整光路

　　根据需要调整光路，如选择荧光样品及基准样品，并选择适当的振幅和分划，以确保测量精度和灵敏度。

5.样品放置

　　将待测样品放入荧光分光光度计的样品池中，并调整相对位置和方向，放置时尽量减少空气氧化时间，尽量避免样品受到光的照射后受到氧化的影响，影响测量准确性。

6.基本测定

　　-荧光激发光谱测定

　　设置仪器参数，扫描发射波长，找到maxhem，以此为发射波长，记录发射强度作为激发波长的函数，便得到激发光谱。

　　-英光发射光谱测定

　　设置仪器参数，扫描激发波长，找到maxhex以此为激发波长，记录发射强度与发射波长间的函数关系，便得到荧光发射光谱。

　　-差谱测定

　　设置仪器参数，选择合适的工作方式，测定背景溶液的发射光谱并储存起来，在一定的工作方式下扫描样品溶液的发射波长，得到当时的光度值和储存的背景值之间的差示值，即差谱。

　　-峰面积积分

　　选择适当的工作方式，对样品溶液进行积分操作，即得到峰面积积分。

　　-荧光强度

　　选择合适的测量参数，设置入ex、hem，采用定点读数或扫描方式，即可测得所选波长处的荧光强度。

　　-定量测定

　　配制一系列已知浓度的标准溶液，在一定的测定条件下，设置入ex、入em，按照由稀至浓的次序，测定标准溶液的荧光强度，绘制荧光强度一浓度的工作曲线，不改变仪器参数测定未知溶液的荧光强度由工作曲线即可求出未知溶液的浓度。

7.数据处理

　　荧光分光光度计测量结果通常是一组数据，在使用荧光分光光度计测量荧光时，根据实验需要对数据进行处理，诸如喷射数据、做图、质量分析等等，通过这些数据处理成果，可以取得重大突破或大体认识。

　　总结：以上是荧光分光光度计的操作方法，供读者参考！